Grupa vitrinite: a - colinita (gri omogen) cu cutinita (neagra). lumina reflectata. Imersie b - colinită (gri omogen), corpocolinită (corp oval gri închis în stânga), telinită (dungă neuniformă în centru). Sferulite albe - pirita. lumina polarizata reflectata. Starea de disparitie; c - vitrodetrinite. lumina reflectata. Imersiune g - colinita (sus), telinita (jos).

Telinit (gri), cauciuc (negru). lumina reflectata. Imersiune.

Fragmente zdrobite cu caracter vitrinit se găsesc foarte des în cărbunele bituminos. Ele formează masa de fond desmocolinit de clarit și trimacerit. De regulă, atunci când sunt examinate în lumină reflectată normală folosind imersie în ulei, aceste fragmente nu pot fi distinse unele de altele. În acest caz, ele sunt combinate sub denumirea de „desmocolinită”. Doar imersiunea cu iodură-metilenă face posibilă distingerea lor clară în cărbune cu un randament ridicat de substanțe volatile. În lumina reflectată prin imersie în ulei, particulele de vitrodetrinite pot fi văzute numai atunci când sunt înconjurate de componente cu o reflectivitate diferită (de exemplu, minerale argiloase în șisturi carbonice sau inertinite în simulare).

Reflexivitatea vitrinitei se calculează atât în ​​aer R а cât și în imersie în ulei R o . r . Prin valoarea lui R o . r este clasa estimată a cărbunelui în clasificarea industrială - genetică (GOST 25543-88).

Pe fig. 2.1 arată relația dintre valoarea calculată a parametrului și reflectanța vitrinitei în aer R a.

Există o corelație strânsă între și Rа: coeficient de corelație de pereche r = 0,996, coeficient de determinare – ​​0,992.

Fig.2.1. Relația dintre parametrul cărbunelui și indicator

reflexiile vitrinitei în aer Ra (puncte deschise și întunecate -

diverse surse)

Dependența prezentată este descrisă de ecuația:

R a \u003d 1,17 - 2,01. (2,6)

Între valoarea calculată și reflectanța vitrinitei în imersie în ulei R o. r conexiunea este neliniară. Rezultatele cercetării au arătat că există o relație directă între parametrul structural al vitrinitei (Vt) și indicii liptinitei (L) și inertinitei (I).

Pentru cărbunii Kuzbass, relația dintre R o. r și următoarele:

R despre. r = 5,493 - 1,3797 + 0,09689 2 . (2,7)

Figura 2.2 prezintă relația dintre reflectanța vitrinitei în imersie în ulei R®. r (op) și calculat prin ecuația (2.7) R o . r(calc).

Fig.2.2. Corelația dintre R experimentat aproximativ. r (op) și R o calculat. r (calc)

valorile indicelui de reflexie al cărbunilor de vitrinite de Kuzbass

Arată în Fig. 2.2 dependenţa grafică se caracterizează prin următorii indicatori statistici: r = 0,990; R 2 \u003d 0,9801.

Astfel, parametrul caracterizează în mod unic gradul de metamorfism carbune tare.

2.3 Densitatea reală a cărbunelui d r

Este cel mai important caracteristici fizice TGI. folosit

la calcularea porozității combustibililor, proceselor și aparatelor pentru prelucrarea acestora etc.

Densitatea reală a cărbunelui d r este calculată prin aditivitate, ținând cont de conținutul din acesta al numărului de moli de carbon, hidrogen, azot, oxigen și sulf, precum și componente minerale conform ecuației:

d = V o d + ΣV Mi d Mi + 0,021, (2,8)

unde V o și V sunt conținutul volumetric al materiei organice și al impurităților minerale individuale din cărbune în fracțiuni de unitate,%;

d și d Mi sunt valorile densităților reale ale materiei organice de cărbune și impurități minerale;

0,021 - factor de corecție.

Densitatea masei organice de cărbune se calculează la 100 g din masa sa d 100;

d 100 = 100/V 100 , (2,9)

unde valoarea lui V 100 este conținutul volumetric al materiei organice din cărbune, fracțiuni de unitate. Determinat de ecuația:

V 100 = n C + H n H + N n N + O n O + S n S , (2.10)

unde n C o , n H o , n N o , n O o şi n So sunt numărul de moli de carbon, hidrogen, azot şi sulf în 100 g WMF;

H , N , O și S sunt coeficienți empirici determinați experimental pentru diverși cărbuni.

Ecuația pentru calcularea V 100 a vitrinitului de cărbune în intervalul conținutului de carbon în ADM de la 70,5% la 95,0% are forma

V 100 \u003d 5,35 C o + 5,32 H o + 81,61 N o + 4,06 O o + 119,20 S o (2,11)

Figura 2.3 prezintă o relație grafică între valorile calculate și reale ale densității vitrinitei de cărbune, adică d = (d)

Există o strânsă corelație între valorile calculate și experimentale ale densității adevărate a vitrinitei. În acest caz, coeficientul de corelație multiplă este 0,998, determinarea - 0,9960.

Fig.2.3. Comparația dintre calculat și experimental

valori ale densității adevărate a vitrinitei

Randamentul substanțelor volatile

Calculat conform ecuației:

V daf = V x Vt + V x L + V x I (2.12)

unde x Vt ,x L și x I sunt proporția de vitrinite, liptinite și inertinite în compoziția cărbunelui (x Vt + x L + x I = 1);

V , V și V - dependența randamentului de substanțe volatile din vitrinite, liptinite și inertinite de parametrul:

V = 63,608 + (2,389 - 0,6527 Vt) Vt , (2,7)

V = 109,344 - 8,439 L, (2,8)

V = 20,23 exp [ (0,4478 – 0,1218 L) ( L – 10,26)], (2,9)

unde Vt , L și I sunt valorile parametrilor calculati pentru vitrinite, liptinite și inertinite în funcție de compoziția lor elementară.

Figura 2.4 prezintă relația dintre randamentul calculat de substanțe volatile în stare uscată fără cenușă și cel determinat conform GOST. Coeficient de corelație perechi r = 0,986 și determinarea R 2 = 0,972.

Fig.2.4. Compararea valorilor experimentale V daf (op) și calculate a V daf (calc).

pentru eliberarea de substanţe volatile din cărbuni neomogeni petrografic

bazinul Kuznetsk

Relația parametrului cu eliberarea de substanțe volatile din zăcămintele de cărbune din Africa de Sud, SUA și Australia este prezentată în Fig. 2.5.

Fig. 2.5 Dependenţa randamentului de substanţe volatile V daf de structura - chimic

parametrii cărbunilor de vitrinite:

1 - Bazinul cărbunelui Kuznetsk;

2 - zăcămintele de cărbune din Africa de Sud, SUA și Australia.

După cum reiese din datele din figură, relația cu eliberarea de substanțe volatile din aceste țări este foarte strânsă. Coeficientul de corelare a perechii este 0,969, determinarea - 0,939. Astfel, parametrul cu fiabilitate ridicată face posibilă prezicerea eliberării de substanțe volatile din cărbunii din zăcămintele mondiale.

Puterea calorică Q

Cea mai importantă caracteristică TGI ca combustibil energetic indică cantitatea posibilă de căldură care este eliberată în timpul arderii a 1 kg de combustibil solid sau lichid sau a 1 m 3 de combustibil gazos.

Există valori calorice mai mari (Q S) și mai mici (Q i) ale combustibililor.

Puterea calorică brută se determină într-un colorimetru, ținând cont de căldura de condensare a vaporilor de apă formată în timpul arderii combustibilului.

Calculul căldurii de ardere a combustibilului solid se efectuează conform formulei lui D.I. Mendeleev pe baza datelor compoziției elementare:

Q = 4,184 [81C daf +300H daf +26 (S - O daf)], (2,16)

unde Q este puterea calorică netă, kJ/kg;

4,184 este factorul de conversie al kcal în mJ.

Rezultatele studiilor TGI au arătat că, având în vedere condițiile neidentice de formare a cărbunelui în bazinele carbonifere, valorile coeficienților pentru C daf , H daf , S și O daf vor fi diferite, iar formula de calcul a puterii calorice are forma:

Q = 4,184, (2,17)

unde q C , q H , q SO sunt coeficienți determinați experimental pentru diferite zăcăminte de cărbune.

În tabel. 2.1 prezintă ecuațiile de regresie pentru calcul căldură mai mică arderea cărbunelui din diverse zăcăminte de TGI Federația Rusă.

Tabel 2.1 - Ecuații pentru calcularea puterii calorifice nete pentru o bombă cu cărbune

diferite bazine ale Federației Ruse

Valorile coeficientului de corelație de pereche dintre puterile calorice calculate prin ecuații și determinate de bombă, prezentate în tabel, arată o corelație strânsă a acestora. În acest caz, coeficientul de determinare variază între 0,9804 - 0,9880.

Numărul de componente fuzionate ∑OK determină categoria cărbunelui și, în combinație cu alți indicatori, face posibilă evaluarea utilizării cărbunelui în tehnologia cocsării.

Parametrul ∑OK este suma conținutului de inertinite I și a părții (2/3) de semivitrinite S v din cărbune:

∑OK = I+ 2/3 S v . (2,18)

Rezultatele cercetării arată că conținutul de componente slabe din cărbuni se corelează cel mai strâns cu influența combinată a parametrilor și a H/C. Ecuația pentru calcularea ∑OK este:

∑OK \u003d b 0 + b 1 + b 2 (H / C) + b 3 (H / C) + b 4 (H / C) 2 + b 5 2. (2,19)

Coeficientul de corelație de pereche al relației ∑OC a diferitelor grade de cărbuni și încărcături ale bazinului Kuznetsk variază de la 0,891 la 0,956.

S-a stabilit că există o relație mai mare între valorile calculate ale lui ∑OK conform ecuațiilor și cele determinate experimental pentru cărbuni metamorfozați medii. Relația lui ∑OK cu cărbunii cu un grad mai mare de metamorfism este redusă.

Lucrări de curs

METODE PETROGRAFICE DE CARBON PENTRU DIAGNOSTICUL CATAGENEZEI MATERIEI ORGANICE

INTRODUCERE

Rocile sedimentare conțin adesea materie organică (MO), care în timpul transformării catagenice dă naștere la petrol și gaze. Și studiul procesului de transformare a acestuia în procesul de sedimentogeneză și catageneza ulterioară este o parte foarte importantă a studiului procesului de formare a petrolului. Până în 1960, DOM a rămas neexplorat și a fost înregistrat și descris ca o masă continuă, omogenă de carbon organic din rocă.Cu toate acestea, vasta experiență acumulată în geologia cărbunelui a făcut posibilă dezvoltarea metodelor de cercetare și aplicarea acestora în studiul DOM.

Petrologia cărbunilor, sau petrografia cărbunelui, este o știință geologică destul de tânără și a apărut datorită necesității de a distinge și de a descrie diferitele componente ale cărbunilor, precum și de a judeca gradul de transformare, stadiul de catageneză a unei roci care conține OM prin alcătuirea lor. Pe primele etape a dezvoltării sale, petrografia cărbunelui a folosit metode de cercetare utilizate în geologie. Deci, de exemplu, secțiunile lustruite au fost folosite în mod activ pentru a studia resturile organice opace, în timp ce secțiunile au fost folosite pentru cele transparente. Specificitatea proprietăților fizice ale cărbunelui este necesară pentru adaptarea metodelor de cercetare, în special pentru schimbarea tehnologiei de pregătire a secțiunilor lustruite etc.

Pe un timp scurt, petrografia cărbunelui a devenit o știință independentă. Și a început să fie folosit pentru a rezolva probleme practice, cum ar fi determinarea compoziției și, ca urmare, a calității cărbunelui, precum și pentru analizarea și prezicerea unor proprietăți valoroase ale cărbunelui, cum ar fi cocsificarea. Odată cu dezvoltarea științei, gama de sarcini de rezolvat s-a extins, iar probleme precum geneza, explorarea și optimizarea utilizării mineralelor combustibile au intrat în sfera cercetării. În plus, metodele studiilor petrografice ale cărbunelui sunt utilizate în mod activ pentru a studia roca DOM. Studiul DOM este de mare importanță, deoarece este foarte răspândită în sedimentare stânci ax și dă naștere la hidrocarburi lichide și gazoase și, de asemenea, poate oferi oamenilor de știință informații valoroase despre setarea faciesului de sedimentare, gradul de catageneză și poate servi și ca geotermometru maxim.

Determinarea gradului de transformare catogenetică cu ajutorul indicatorilor petrografici a cărbunelui ajută la rezolvarea unui număr de probleme teoretice și practice, de exemplu, în explorarea și evaluarea perspectivelor de prospectare a mineralelor în această regiune, precum și determinarea direcțiilor de desfășurare a activităților de prospectare geologică, precum și studierea procesului de formare a petrolului și gazelor. De asemenea, metodele de petrografie a cărbunelui și-au găsit aplicație în alte domenii ale geologiei, de exemplu, ele sunt folosite pentru a restabili condițiile tectonice, climatice ale sedimentării, precum și faciesul unui sediment dat, iar în stratigrafie pentru dezmembrarea secțiunilor tăcute.

Datorită utilizării metodelor de petrografie pe cărbune, natura materialului inițial al sapropel OM a fost clarificată. De asemenea, s-a sugerat că motivul acumulării și conservării unor mase mari de OM sapropelic cu un potențial ridicat de petrol și gaz este activitatea antibacteriană a lipidelor algelor. Clasificarea facies-genetică a DOM a fost completată. A fost dezvoltată o scară de catogeneză DOM bazată pe microcomponente sapropelice.

materii organice microcomponente catageneza vitrinitei

CAPITOLUL 1. Catageneza materiei organice

Catageneza este cea mai lungă etapă a transformării OM, care continuă diageneza și precede transformarea metamorfică. Adică atunci când efectele barice și termice încep să joace un rol predominant în transformarea rocilor.

Catageneza este unul dintre factorii de control în procesul de formare a uleiului. În catageneză se află așa-numita zonă principală de formare a gazelor și petrolului.

Acesta este probabil motivul pentru care studiul procesului de conversie a OM joacă un rol atât de important în cercetarea petrolului. În plus, studiul catagenezei este important nu numai pentru geologia petrolului, ci permite și rezolvarea problemelor de geologie istorică, geologie structurală, ajută la căutarea și evaluarea corpurilor de minereu, acumulări de caustobioliți solizi.

Acum, se obișnuiește să se evidențieze proto-catogeneza, mezo-catogeneza și apo-catogeneza în catageneză.

Fiecare dintre aceste etape este împărțită în faze mai mici, diferiți cercetători folosesc scale diferite, cea mai comună este scara, care se bazează pe indici de litere.

Acești indici corespund claselor de cărbune, care tocmai sunt înlocuite în procesul de transformare catagenetică.

Sunt aprobate și utilizate atât în ​​geologia cărbunelui, cât și a petrolului.

Uneori o stare intermediară este fixată în resturi organice, când determinarea exactă a stadiului de catageneză este oarecum dificilă.

În acest caz, se folosește un indice dublu, care este o combinație de litere care denotă etapele următoare ale catagenezei.

LA surse diferite există diferite opțiuni pentru desemnarea etapelor pentru comparație, mai multe dintre ele pot fi citate.

În procesul de catageneză are loc o modificare a OM, și este rezultatul acțiunii unui întreg complex de diverși factori, principalii fiind temperatura, presiunea și timpul geologic. Să luăm în considerare influența acestor trei factori mai detaliat. Se crede că rolul dominant în procesul de catageneză este ocupat de temperatură, ceea ce se explică prin rolul temperaturii în procesele chimice. Acest lucru este confirmat de unele date practice și experimentale [Parparova G.M., 1990; 136]. Cel mai important rol al temperaturii reflectă regula lui Hilt. Esența căruia constă în faptul că în bazinele carbonifere, cu adâncime tot mai mare, cărbunii sunt combinați cu substanțe volatile și îmbogățiți în carbon, adică. sunt carbonificate.

Sursele de căldură în timpul catagenezei pot fi numite energie eliberată în timpul dezintegrarii radioactive, procese magmatice, procese tectonice, precum și o creștere generală a temperaturii în timpul tasării straturilor în procesul de metamorfism regional. În timpul proceselor magmatice, are loc un efect termic local intens, în timpul căruia regimul de geotemperatură al unei anumite zone a scoarței terestre se modifică semnificativ. Efectul termic în timpul proceselor tectonice este de asemenea local, dar slab exprimat, deoarece se manifestă numai în condițiile unui flux rapid al procesului în sine și în absența unei îndepărtari intensive a căldurii din vatră.

Întrebarea temperaturilor specifice reale în timpul procesului de catageneză și de formare a cărbunelui rămâne controversată.

Problema este complicată de lipsa metodelor directe de determinare a paleotemperaturii, drept urmare toate judecățile despre acestea se bazează exclusiv pe date indirecte și metode de cercetare. Opiniile oamenilor de știință în evaluarea temperaturilor reale diferă. Anterior, se credea că temperatura ar trebui să fie ridicată: pentru cărbunii bituminoși 300-350 °C, pentru antracit 500-550 °C. În realitate, aceste temperaturi sunt considerabil mai scăzute decât se aștepta pe baza datelor de modelare și experimentale. Toți cărbunii s-au format la o adâncime care nu depășește 10 km, iar temperatura care însoțește acest proces nu a depășit 200-250?150?S.

Acum, conform rezultatelor studierii zonelor de alterare a contactului rocilor din apropierea camerei magmatice, precum și conform altor date, putem spune că temperatura acestui proces variază de la 90 la 350 °C. Temperatura maximă este atinsă la tasarea maximă a straturilor; în această perioadă are loc catogeneza maximă a OM.

Presiunea, împreună cu temperatura, este considerată a fi cel mai important factor în modificările OM în timpul catagenezei. Există diverse opinii controversate despre rolul presiunii în procesul de catageneză. Unii cercetători consideră că presiunea este unul dintre cei mai importanți factori ai catagenezei. Alții cred că presiunea se exercită influenta negativa pentru procesul de carbonizare. Deci, de exemplu, se crede că presiunea contribuie la compactarea materialului de rocă și, ca urmare, la convergența părților sale constitutive; se crede că acest lucru contribuie la o mai bună interacțiune între ele și procesul de transformare. Acest lucru este evidențiat de încălcarea anizotropiei vitrinitei. Există o altă părere despre această problemă, unii oameni de știință cred că nu presiunea este factorul principal în transformare, ci eliberarea de căldură și creșterea temperaturii care însoțesc schimbările tectonice.

Prin urmare, în cele mai multe cazuri, în curele pliate, condiții de compresie activă, gradul de transformare a OM este vizibil mai mare decât în ​​zonele platformei [Fomin A.N., 1987; 98]. Pe de altă parte, procesul de coalificare este însoțit de eliberare abundentă de gaz și, ca urmare, o creștere a presiunii ar trebui să schimbe echilibrul acestui proces în direcția opusă, adică. rezultă că presiunea joacă un rol negativ în procesul de transformare a OM. Deși nu trebuie să uităm că presiunea și temperatura în procesul natural sunt legate. Și natura transformării OM la aceeași temperatură. Dar diferitele presiuni vor fi diferite. Deci presiunea joacă rol importantîn procesul de transformare a OM, dar, desigur, este secundar și nu poate fi comparat cu rolul temperaturii.

Un alt factor în procesul de transformare catogenetică este timpul geologic; rolul său este cel mai greu de studiat, din cauza lipsei posibilității de observare directă și de studiu a influenței timpului asupra procesului de catageneză. Există opinii diferite ale oamenilor de știință cu privire la această problemă. Unii oameni de știință consideră că timpul geologic nu are un impact semnificativ asupra procesului de transformare a OM, făcând referire la descoperirea unui OM antic, dar, totuși, ușor transformat. Alții susțin că timpul poate compensa lipsa temperaturii, această afirmație se bazează pe principiul lui Le Chatelier, care spune că o creștere a temperaturii cu aproximativ 10 grade implică o dublare a vitezei de reacție. Folosind această lege, unii oameni de știință susțin că, pe o perioadă lungă de timp, reacția poate avea loc la o temperatură arbitrar scăzută a procesului. Dar nu trebuie să uităm că procesul de carbonificare are loc cu absorbția de căldură și, ca urmare, pentru ca reacția să continue, este necesar să aducem sistemul într-o stare în care să depășească bariera necesară de activare a energiei. Se presupune că valoarea temperaturii necesară pentru a începe procesul de conversie a OM este de 50°C [Fomin A.N., 1987; 100]. Prin urmare, timpul, aparent, poate compensa temperatura doar în anumite limite.

De asemenea, trebuie menționat un astfel de factor precum compoziția litologică a rocilor aflate în catageneză. Influența acestui factor este confirmată de datele experimentale. Deci, de exemplu, P. P. Timofeev a fost primul care a atras atenția asupra faptului că conținutul de carbon din vitren crește în mod natural, în timp ce conținutul de oxigen scade în seria gresie-argilit-cărbune. G. M. Parparova a mai arătat că în depozitele mezozoice ale regiunii Surgut din Siberia de Vest, s-a demonstrat că în gresii și nămol, indicii de refracție ai vitrenului sunt în mare parte cu 00,1 - 00,2 mai mici decât în ​​noroiurile și rocile carbonice.

Este posibil ca acest efect să fie asociat cu capacitatea diferită a rocilor de a se încălzi, de exemplu, catageneza anormal de scăzută a OM la adâncimi mari în regiunea depresiunii Caspice se explică prin efectul conducător de căldură al domurilor de sare, care joacă rolul frigiderelor naturale naturale. Rolul compoziției litologice nu a fost încă stabilit în mod fiabil. Autorii explică această incertitudine din diverse motive, cum ar fi tipul de asociere a plantelor, gradul de gelificare și alterarea biochimică a rocilor în timpul catagenezei. În plus, există date care indică absența unei relații între compoziția litologică și indicatorii de catogeneză, în condiții similare [Fomin A.N., 1987; 115]. Aceste date fac posibilă unificarea datelor privind modificarea proprietăților optice ale OF în timpul transformării sale.

LA proces general catageneza depinde în principal de temperatură, într-o măsură mai mică de o serie de alți factori.

Când se studiază catageneza, se folosesc diverse metode. Cele mai fiabile și precise sunt metodele de cercetare petrografică a cărbunelui. În special, diagnosticarea stadiului de catageneză prin reflexivitatea microcomponentelor comune ale rocilor. Aceste metode sunt simple în natură, nu necesită echipamente sofisticate și, cel mai important, sunt fiabile. Pe lângă metodele petrografice ale cărbunelui, sunt utilizate o serie de alte caracteristici, care se bazează în principal pe compoziția chimică. Aceștia sunt indicatori precum: compoziția elementară a kerogenului, randamentul componentelor volatile, spectroscopia IR a bitumoizilor și mulți alții, nu sunt atât de exacti, dar împreună pot da estimări precise, mai ales când vine vorba de apocatogeneză, deoarece caracteristicile genetice ale OM nu mai sunt afectate aici.

Măsurarea parametrilor petrografici ai carbonului, din punctul de vedere al raționalității tehnologiei de cercetare, are o serie de avantaje: este posibilă măsurarea rapidă și precisă a indicilor de reflexie și refracție pe un eșantion de dimensiuni reduse, adesea insuficient pentru efectuarea analiza chimica; este posibil să se efectueze cercetări asupra incluziunilor microscopice din rocă; în urma analizei, obținem parametri nu ai unui complex de microcomponente, ci ai unuia specific, ceea ce face posibilă aplicarea acestei metode la toate bazinele sedimentare, deoarece anumite microcomponente sunt omniprezente și pot servi drept semn de diagnostic fiabil pentru stadiile de catageneza. Vitrinitul este o microcomponentă atât de răspândită, reflectivitatea sa este măsurată în principal. Vitrinitul este, de asemenea, convenabil prin faptul că are o schimbare regulată a proprietăților sale optice în timpul procesului de conversie. De aceea reflectivitatea vitrinitei este luată ca standard pentru diagnosticarea stadiilor de catageneză.

CAPITOLUL 2 Reflectivitatea maceralelor din materie organică

Reflectivitatea vitrinitei

Dintre toate microcomponentele OM, vitrinitul este cel mai bun din punct de vedere al caracterului indicativ în studierea gradului de transformare catogenetică. Faptul este că, pentru diagnosticare fiabilă, este nevoie de o microcomponentă, care trebuie să aibă o schimbare regulată a proprietăților în timpul procesului de transformare, în același timp, trebuie să fie distribuită pe scară largă în OM. Vitrinite îndeplinește toate cerințele de mai sus, spre deosebire de alte microcomponente de cărbuni și DOM. Care fie se contopesc cu masa organică totală a cărbunelui aflat deja în stadiile mijlocii ale catagenezei (leuptinită), fie reacţionează slab şi inegal la modificările parametrilor de mediu (fusinit). Și numai vitrinitul își schimbă proprietățile în mod natural treptat și este foarte ușor de diagnosticat.

Pe baza reflectivității vitrinitei sunt construite majoritatea scalelor pentru determinarea gradului de catageneză. Pe lângă acesta, sunt utilizate și alte microcomponente ale DOM, dar într-o măsură mai mică. Metoda se bazează pe modelul de creștere a luciului în timpul catagenezei. Acest lucru poate fi ușor de văzut vizual dacă luăm în considerare schimbarea strălucirii cărbunilor în procesul de schimbare a acestora. Nu sunt necesare instrumente speciale pentru a observa că strălucirea antracitului, de exemplu, este mult mai mare decât cea a cărbunelui brun. Reflectivitatea este strâns legată de structura internă a unei substanțe, și anume de gradul de împachetare a particulelor într-o substanță. De asta depinde ea. Desigur, studiul gradului de catogeneză prin reflectivitate se realizează folosind echipamente speciale, de exemplu, dispozitivul POOS-I constă dintr-un microscop polarizant, un atașament optic, un tub fotomultiplicator (PMT) și un dispozitiv de înregistrare. Când se efectuează un studiu, se compară fotocurenții cauzați de lumina reflectată de pe suprafața probei și standardul.

Deci, vitrinitul, sau mai degrabă reflectivitatea sa, a fost luată ca standard pentru cercetare. Se măsoară folosind diverse fotometre și standarde în aer și mediu de imersie cu incidență strict perpendiculară a luminii pe o suprafață de probă bine lustruită. Măsurătorile sunt efectuate numai într-un interval îngust de lungimi de undă: de la 525 la 552 nm. Această limitare este legată de specificatii tehnice dispozitiv. O lungime de undă de 546,1 nm este luată ca standard, dar fluctuațiile mici în jurul acestei valori nu au practic niciun efect vizibil asupra valorii măsurate. Proba se fixează pe platoul microscopului și se oprește astfel încât suprafața sa să fie perpendiculară pe axa atașamentului optic. După cum sa menționat mai sus, măsurăm intensitatea luminii reflectate alternativ la probă și standard folosind un PMT. Prin definiție, reflectivitatea este capacitatea de a reflecta o parte din lumina care lovește o suprafață. Dacă traducem acest lucru în limbaj numeric, atunci acesta este raportul dintre lumina reflectată și incidentă.

Care poate fi scris ca:

Unde I1 este intensitatea luminii reflectate și I2 este intensitatea luminii incidente. În practică, atunci când se efectuează măsurători, se utilizează formula

Aici R este indicele de reflexie dorit, d este citirea dispozitivului la măsurarea substanței de testat și, respectiv, R1 este reflectanța standardului și d1 este citirea dispozitivului la măsurarea standardului. Dacă setați dispozitivul receptor la zero pentru referință, atunci formula se simplifică la R=d.

Pe lângă vitrinit, pentru măsurători sunt folosite și alte microcomponente OM. Unele dintre ele au proprietatea anizotropiei de reflectivitate. De obicei sunt utilizați trei parametri de măsurare: Rmax Rmin Rcp. Creșterea anizotropiei vitrinitei în timpul catagenezei se datorează în principal procesului de ordonare treptată a micelilor humici aromatici asociat cu o creștere a presiunii odată cu creșterea adâncimii de imersie. Măsurătorile în cazul unui preparat anizotrop nu diferă conceptual de măsurarea unei probe omogene, dar se efectuează mai multe măsurători. Etapa microscopului se rotește 360? la intervale de 90?. Două poziții cu reflectivitate maximă și două cu cea minimă sunt întotdeauna detectate. Unghiul dintre fiecare dintre ele este de 180?. Se fac măsurători pentru mai multe fragmente de rocă iar valoarea medie este calculată ulterior. Ca medie aritmetică a mediilor măsurătorilor maxime și minime:

Puteți determina imediat valoarea medie alegând un unghi de rotație de 45? de la valoarea maximă sau minimă, dar această măsurătoare este valabilă numai atunci când se studiază un OF slab transformat.

Când se efectuează cercetări, există mai multe probleme asociate cu tehnologia. De exemplu, dacă avem o rocă cu un conținut total scăzut de materie organică, atunci este nevoie de o prelucrare specială a probei și transformarea acesteia în formă de secțiuni concentrate lustruite-brichete. Dar în procesul de obținere a concentratelor, materia organică originală este supusă unui tratament chimic, care nu poate decât să afecteze proprietățile optice ale substanței. În plus, se pierd informații despre structura materiei organice a rocii. Distorsiunile în măsurători pot fi introduse și prin faptul că tehnologia procesului de preparare a medicamentelor nu este standardizată și gradul de pregătire a probei este de obicei determinată vizual. Problema este aceeași proprietăți fizice roci, precum mineralizarea puternică sau fragilitatea cărbunelui, în acest caz este necesar să se studieze reflectivitatea pe suprafața care poate fi obținută. Dacă zona este aleasă corect, atunci defectele din jur practic nu afectează măsurătorile. Dar, în mod fundamental, valorile cantitative ale erorilor practic nu afectează determinarea stadiului de catageneză.

Probele sunt studiate, de obicei în condiții normale de aer, este ușor, rapid. Dar dacă aveți nevoie de un studiu detaliat la mărire mare, se folosesc medii de imersie, de obicei ulei de cedru. Ambele măsurători sunt corecte și fiecare dintre ele este folosită, dar fiecare în felul său. anumit caz. Avantajele măsurătorilor într-un mediu de imersie sunt că permit studierea particulelor cu o dimensiune mică; în plus, claritatea crește, ceea ce face posibilă diagnosticarea gradului de catageneză mai detaliat.

O dificultate suplimentară în cercetare este diagnosticarea microcomponentelor OM, deoarece acestea sunt de obicei determinate în lumină transmisă. În timp ce reflectivitatea este evident în reflectat. De aceea. De obicei, în procesul de cercetare sunt combinate două metode. Adică, lumina transmisă și reflectată sunt utilizate alternativ pentru a studia același fragment DOM. Pentru aceasta, se folosesc de obicei secțiuni lustruite pe ambele părți. În ele, după vizualizarea și determinarea microcomponentului în lumina transmisă, se comută iluminarea și se fac măsurători în lumină reflectată.

Vitrinitul poate fi folosit nu numai pentru a determina gradul de transformare a materiei organice, ci și pentru a determina relația acesteia cu roca. În vitrinitul singenetic, fragmentele sunt de obicei alungite, particulele sunt paralele cu planurile de așternut și au de obicei o structură celulară. Dacă avem de-a face cu particule de vitrinite de formă rotunjită, atunci cel mai probabil aceasta este o substanță redepusă.

Reflectivitatea altor microcomponente ale OF

Fără îndoială, vitrinitul este cel mai convenabil pentru determinarea gradului de catageneză al microcomponentelor OM, dar nu este întotdeauna posibil să o detectăm în rocă și nu este întotdeauna bine conservată. În acest caz, alte microcomponente ale cărbunelui sunt studiate pentru a studia etapele catagenezei, de exemplu, semivitrinite SVt, semifusinite F1, fusinite F3, leuptinite L. Scalele de catageneza au fost deja compilate pe baza datelor din studiile acestor componente. Ele fac posibilă utilizarea rezultatelor obținute în studiul semivitrinitei, semifusinitei și fuzinitei pentru diagnosticul stadiilor. Precizia determinării este limitată de etapă, datorită neliniarității modificării proprietăților optice ale acestor microcomponente. Neliniaritatea este caracteristică etapelor inițiale ale transformării, care este asociată cu caracteristicile genetice primare ale OM. În etapele ulterioare, reflectivitatea tuturor microcomponentelor crește uniform.

Unii oameni de știință au încercat să folosească reflectivitatea pentru a determina transformarea OM. Adevărat, este aplicabil numai într-un interval îngust, limitarea este asociată cu problema diagnosticării leuptinitei în sine. Reflexivitatea sa variază de la 0,04% R? în stadiul B până la 5,5% R? la stadiul de antracit. Natura generală a modelului de schimbare a reflectivității este similară cu vitrinita, dar diferă de aceasta din urmă în valori absolute.

Mai sus sunt luate în considerare metode de determinare a gradului de conversie a OM prin microcomponente de humus, iar această metodă poate fi aplicată depozitelor surse de petrol dacă acestea conțin resturi de vegetație terestră superioară. Adesea, însă, situația este diferită și în rocă sunt prezente doar soiurile sapropel de materie organică. Atunci se pune întrebarea dacă este posibil să se diagnosticheze etapele catagenezei de către anumite componente ale OM sapropelic. Unii cercetători folosesc pe scară largă indicele de refracție al coloalginitei, colochitinitei, pseudovitrinitei și altor resturi de sedimente marine [ Fomin A.N., 1987; 121]. Dar, în același timp, trebuie utilizate concentrate de kerogen, care nu pot decât să afecteze caracteristicile substanței. Mult mai precisi sunt indicatorii fluxului de microcomponente OM, care au un caracter regulat de modificări ale proprietăților în procesul de transformare și care pot fi studiati în secțiuni lustruite - piese, fără a modifica natura prezenței OM în stâncă. În plus, pseudovitrinitul este omniprezent în rocile sursă, ceea ce face posibilă unificarea scării.

Comportamentul pseudovitrinitei a fost studiat pe baza probelor care conțin atât humus, cât și componente sapropel ale materiei organice și s-a derivat o regularitate a schimbării reflectivității. S-a dovedit că în întregul interval al scalei de catageneza, reflectivitatea pseudovitrinitei este mai mică decât cea a vitrinitei. În etapele ulterioare, are loc o încetinire a ratei de creștere a reflectivității în pseudovitrinite, în timp ce în vitrinite, dimpotrivă, viteza de creștere crește [Fomin A.N., 1987; 123].

În plus față de toate microcomponentele de mai sus ale DOM, incluziunile organice de bituminit se găsesc adesea în straturile sedimentare. Bituminitul apare în pori, fisuri și de-a lungul periferiei golurilor. Materialul sursă pentru acesta a fost naftidele lichide sau plastice, care au migrat și au rămas în rocă. Ulterior, s-au transformat odata cu el, supuse la presiuni, temperaturi, s-au intarit si au devenit solide. După caracteristicile bituminitului, se poate aprecia gradul de transformare a rocii după migrare. Dar trebuie luat în considerare faptul că migrarea HC este un proces lung și, ca urmare, se poate întâlni o situație de discrepanță a datelor într-un eșantion. Există mai multe varietăți de bituinit: diabituminit, katabituminit și metabituminit.

CAPITOLUL 3 Indicele de refracție al componentelor optice

Pe lângă reflectivitate, un parametru precum indicele de refracție este utilizat pe scară largă în practica cercetării. Indicele de refracție este un semn al modificărilor secundare ale structurii moleculare a microcomponentelor OM în timpul catagenezei. Și ca urmare, prin măsurarea indicelui de refracție al anumitor microcomponente, este posibil să se diagnosticheze cu suficientă acuratețe gradul de transformare a unui anumit depozit care conține materie organică. Cea mai graduală schimbare a indicelui de refracție are loc în vitrinite; pentru aceasta a fost compilată o scală a indicelui de refracție pentru întreaga catageneza. Se folosesc și alte microcomponente, dar într-o măsură mai mică.

Precizia metodei este asigurată de o astfel de proprietate a materiei organice precum transparența. Deci, de exemplu, gradul de transformare la etapele B-T când OF este transparent în lumina transmisă. Indicele de refracție, desigur, poate fi utilizat și în studiul OM al etapei antracit, cu toate acestea, apare o problemă în diagnosticarea microcomponentelor, deoarece la o etapă înaltă de transformare proprietățile optice ale microcomponentelor converg în mod vizibil. Intervalul de determinare a parametrilor optici depinde de lichidul utilizat, de exemplu, atunci când se utilizează lichide convenționale de imersie, este posibil să se determine etapele B și D. Când se utilizează lichide de imersie foarte refractivă, este posibil să se diagnosticheze etapele B - A inclusiv. Dacă, totuși, se folosesc aliaje de iodură de arsen, antimoniu cu piperina, este posibil să se determine etapele G - T.

Măsurătorile se efectuează pe un fir de probă măcinat fin. Se obtine prin simpla extractie mecanica din roca, urmata de macinare, sau prin extractie chimica.

Studiul este realizat într-o manieră similară cu măsurarea reflectivității, adică metoda comparativă. Pentru a face acest lucru, mai multe particule carbonice sunt plasate pe o lamă de microscop și distribuite lin pe suprafața de sticlă, astfel încât particulele să nu se atingă sau să se suprapună; și acoperit cu un alt pahar. Un lichid cu indicele de refracție așteptat al probei este plasat în cavitatea dintre pahare. Dacă determinarea vizuală nu este sigură, este indicat să se pregătească mai multe preparate cu diferite lichide.

Pentru a determina grade ridicate de transformare, se folosesc aliaje; pentru prepararea preparatelor, este necesară topirea substanței și plasarea particulelor de substanță în topitura rezultată. Definiția în sine este similară cu definiția lichidelor de imersie. Se bazează pe un astfel de fenomen precum banda lui Beke, este o margine subțire de lumină în jurul preparatului de testare, apare la marginea a două medii cu indici de refracție diferiți. Pentru a efectua măsurarea, este necesar să reglați claritatea microscopului și să găsiți banda Becke, apoi îndepărtați ușor tubul microscopului, în timp ce banda se va deplasa către mediul care are un indice de refracție mai mare. Dacă banda se deplasează spre partea lichidă a probei, atunci are un indice de refracție mai mare și invers. Astfel, comparând succesiv indicele de refracție a probei cu indicii lichidelor cunoscute, se poate realiza dispariția completă a benzii, atunci putem spune că indicele de refracție este egal cu cel de referință.

CAPITOLUL 4. Diagnosticul vizual al etapelor de catageneză

Pentru o evaluare mai calitativă și mai rapidă a stadiului de catogeneză, este necesar să se efectueze o evaluare calitativă aproximativă a transformării OM înainte de o evaluare cantitativă precisă. Aceasta se realizează de obicei pe motive vizuale, cum ar fi culoarea în lumina transmisă și reflectată, păstrarea structurii anatomice, relieful, precum și culoarea și intensitatea strălucirii în razele ultraviolete. În ciuda păstrării caracteristicilor materialului vegetal inițial al microcomponentelor, fiecare dintre ele își schimbă proprietățile optice, chimice și fizice în timpul carbonizării. Dar asta se întâmplă cu viteze diferite, unii reacţionează foarte puternic. Prin urmare, pentru diagnosticarea vizuală, este necesar să se utilizeze în principal componente lipoide, care sunt foarte sensibile la modificările condițiilor de mediu. Acest lucru le afectează foarte mult culoarea și, ca rezultat, se poate judeca gradul de transformare după culoarea microcomponentelor.

Diferiți parametri ai microcomponentelor reacționează diferit la procesul de transformare, de exemplu, structura anatomică a microcomponentelor se pierde treptat. În stadiile B - G, este distinctă, mai târziu este ascunsă treptat. În același timp, în timpul creșterii etapei de catageneză, relieful microcomponentelor crește în HTO. Anizotropia microcomponentelor crește, de asemenea, în cursul catagenezei. În general, anizotropia unor microcomponente crește în timpul transformării. Anizotropia, în general, este proprietatea oricărei substanțe de a avea sensuri diferite unele proprietăți în direcții diferite, cristalografice, sau pur și simplu legate de structura substanței, aceasta se manifestă în primul rând în culoarea substanței. Culoarea se schimbă în funcție de direcția de vibrație a luminii polarizate care trece prin substanță. Acest fenomen se numește pleocroism. Se observă în lumină transmisă la un nicol. Când se folosește lumina reflectată, anizotropia probei se manifestă prin polarizarea acesteia.

Pentru fiecare etapă a transformării OM, există un anumit set de caracteristici vizuale și pot fi utilizate pentru a diagnostica cu ușurință etapele catagenezei. Să le luăm în considerare mai detaliat.

Stadiul B se caracterizează prin faptul că componentele lipoide la un nicol sunt aproape albe, cu o ușoară nuanță gălbuie. Vitrinitul este portocaliu-roșu sau maro cu o tentă roșie, cu fisuri de uscare și o structură bine conservată, care poate fi folosită pentru a determina dacă substanța aparține unui anumit tip de țesut vegetal. În nicolele încrucișate, componentele lipoide sunt practic omogene sau prezintă puține limpeziri. Particulele individuale practic nu sunt ordonate, sporii sunt ușor aplatizați. În lumina reflectată, vitrinitul este gri, leuptinitul are un ton maroniu-gri, sporii sunt clar vizibili și înconjurați de o margine caracteristică.

Etapa D se caracterizează printr-o ordine mai mare în aranjarea resturilor vegetale. Leiptinitul este galben deschis, anizotrop. Componentele gelificate sunt ușor de distins, culoarea lor se schimbă de la galben roșcat la roșu maroniu. În această etapă începe clar să apară anizotropia OM.Anizotropia tisulară se manifestă în vitrinite structurale. Adesea, în nicoli încrucișați, se poate urmări structura țesuturilor substanței originale. Dacă probele sunt observate în lumină reflectată, atunci OM este în general izotrop; la un nicol, compoziția și structura sa se disting clar. Cutinita este gri maronie și se distinge bine. Vitrinite are tonuri de gri de intensitate diferită.

La etapa D, gradul de ordine crește, orientarea microcomponentelor este paralelă cu așternutul. Componentele cu o structură de țesut, o structură de grilă se disting clar. Cea mai importantă caracteristică de diagnosticare este culoarea cojilor de spori; pe această bază, este posibilă împărțirea acestei etape în substadii. La subetapa G1 sunt galbene aurii și mai rar galben pai, la G2 sunt galbene, la G3 sunt galbene închise. Vitrinitul se caracterizează printr-o culoare galben-roșiatică. În lumina reflectată, leiptinitul este gri-maroniu sau gri, sporii sunt în relief, iar vitrinitul este gri.

Stadiul G este caracterizat prin spori portocalii atât în ​​lumina transmisă, cât și în cea reflectată. După nuanțele de portocaliu, stadiul G poate fi împărțit în trei substadii: G1 se caracterizează printr-o nuanță galbenă, pe G2 sunt portocalii și portocaliu închis, pe G3 cu o tentă roșiatică. În lumina reflectată, sporii sunt caracterizați prin tonuri de bej-gri în stadiul G1, gri nisip în stadiul G2 și gri deschis la G3.

În stadiul K se disting două substadii K1 și K2. În stadiul K1, leuptinita are un ton roșcat în lumina transmisă, în reflectare este alb-cenusie. În substadiul K2, doar fragmente maro unice de sporinită sau cutinită sunt vizibile în lumina transmisă. Structura substanței gelificate este practic monolitică, fără o manifestare distinctă a structurii substanței originale.

Etapa OS este împărțită cantitativ în două substadii: OS1 și OS2, dar practic nu se pot distinge prin caracteristicile petrografice. În masa totală, este posibil să se distingă rămășițele individuale de cutinită sau spori. Toate detaliile structurii OF sunt clar vizibile în principal în lumina transmisă. Cu nicolele încrucișate, structura secundară este clar vizibilă, uneori primară diferite feluri vitrinită.

Etapa T, ca și OS, este împărțită în două substadii. În stadiul T sunt vizibile componente lipoide rare, care au o culoare maronie. Există un pleocroism distinct, care se vede mai bine la substadiul T2 decât la substadiul T3. În masa organică se observă doar dungi luminoase unice și fragmente filamentoase.

În stadiul de PA, în secțiuni subțiri cu un nichel, componentele gelificate sunt maro-roșiatice, maro, mai rar negre. Leiptinitul are un ton ușor maroniu. Sporinitul și cutinitul în nicoli încrucișați sunt galben-roz. Cele mai anizotrope sunt fragmentele de vitrinit și unele formațiuni albe asemănătoare ca formă cu leuptinitul. În stadiul A, în secțiuni subțiri lustruite, materia organică strălucește doar pe alocuri. În lumina reflectată, datorită unei anizotropie distinctă, multe detalii din structura microcomponentelor individuale sunt relativ bine distinse atât la unul cât și la doi nicoli. În cursul catagenezei, culoarea microcomponentelor grupului alginit se schimbă și ea. Acest lucru apare cel mai natural în talamoalginit, resturi conservate de alge. Deci, de exemplu, în intervalul de stadii de catageneză de la B la G, culoarea sa în lumina transmisă. În plus, odată cu creșterea catagenezei, capătă o nuanță cenușie. În stadiul B, talamoalginitul are o luminiscență galben-verzuie strălucitoare, rar albastră. În etapele D și D, intensitatea sa slăbește vizibil și nu mai este fixată în stadiul G. În lumina reflectată, culoarea talamoalginitului se schimbă de la întuneric în stadiile inițiale ale catagenezei la gri-alb în antracit.

În general, componentele lipoide reacționează cel mai clar la modificările condițiilor termobarice. Colorarea componentelor gelificate și algelor este un semn indicativ pentru mine. în timpul catagenezei. Fiecare dintre microcomponente rămâne individuală și păstrează anumite caracteristici. Dar proprietățile fizice și alte caracteristici suferă modificări semnificative. Secvența generală a modificărilor indicatorilor petrografici ai cărbunelui este prezentată în Tabelul 1.

Etapa de catageneza		Anizotropie
	Cu o nicole	Cu nicole încrucișate
	vitrinit	leuptinită	vitrinit	leuptinită
	Gri închis, închis
	Gri închis, diverse nuanțe Parametrii spectrului de rezonanță paramagnetică electronică (EPR). Structura hiperfină a spectrelor EPR. Factorii care afectează oportunitatea utilizării metodei, caracteristicile aplicării acesteia. Determinarea genezei materiei organice dispersate și uleiului. rezumat, adăugat la 01.02.2015 Schema de formare a bitumului conform lui Uspensky, Radchenko, Kozlov, Kartsev. Compoziția elementară medie a organismelor vii și a caustobioliților de diferite grade de transformare. Transportul și acumularea materiei organice. Diagrama tipurilor de kerogene de D. Crevelen. rezumat, adăugat 06.02.2012 Elemente tectonice ale suprafeței subsolului și stadiului structural inferior al învelișului sedimentar. Distribuția litologică și stratigrafică a rezervelor de petrol. Potențialul de petrol și gaze al jgheabului Pripyat. Caracteristicile geochimice ale materiei organice, uleiurilor și gazelor. lucrare de termen, adăugată 27.12.2013 Proprietati optice apele lacului. Influența transparenței asupra regimului luminii. o scurtă descriere a principalele habitate ale organismelor din lac. Ciclul materiei organice și tipurile biologice de lacuri. Biomasa, productivitatea și schema de creștere excesivă a rezervorului. lucrare de termen, adăugată 20.03.2015 Proprietățile optice ale apelor lacului. Influența transparenței asupra regimului luminii. Scurtă descriere a principalelor habitate ale organismelor din lac. ciclul materiei organice. Biomasa și productivitatea lacului. Schema creșterii sale. Tipuri biologice de lacuri. lucrare de termen, adăugată 24.03.2015 Determinarea rolului jucat de substanțele vii în formarea crustei de intemperii - un produs liber al modificărilor rocilor formate sub sol, inclusiv din cauza soluțiilor care provin din acesta. Funcțiile materiei vii în procesul de intemperii. raport, adaugat 02.10.2011 Zonarea tectonice și caracteristicile litologice și stratigrafice ale subsolului și acoperirii sedimentare a regiunii Mării Barents. Factori și scară de catageneză utilizate în evaluarea modificărilor catagenetice în depozitele studiate ale megaswellului Admiralteisky. teză, adăugată 04.10.2013 Clasificarea lianților organici: bitum natural, bitum uleios; gudron de cărbune, ardezie, turbă, gudron de lemn; polimerizare, polimeri de policondensare. Caracteristici ale compoziției, structurii, proprietăților lor. Lianți compuși. rezumat, adăugat 31.01.2010 Modelarea transferului de masă al materiei în condiții apropiate de naturale pentru a explica unele procese geologice. de fabricație echipament de laborator pentru efectuarea de experimente pentru studiul caracteristicilor transferului de masă în lichide vâscoase. prezentare, adaugat 25.06.2011 Istoria producției practice de nămol organic de natură vegetală. Conținutul ipotezelor vulcanice și spațiale ale teoriei abiogene a originii petrolului. Descrierea etapelor de sedimentare și transformare a reziduurilor organice în ulei de munte.

Pagina 1

pagina 2

pagina 3

pagina 4

pagina 5

pagina 6

pagina 7

pagina 8

pagina 9

pagina 10

pagina 11

pagina 12

pagina 13

pagina 14

pagina 15

pagina 16

pagina 17

pagina 18

pagina 19

AGENȚIA FEDERALĂ DE REGLEMENTARE TEHNICĂ ȘI METROLOGIE

NAŢIONAL

STANDARD

RUSĂ

FEDERAŢIE

PRODUSE MEDICALE PENTRU DIAGNOSTIC

IN VITRO

Informații furnizate de producător cu reactivii de diagnostic in vitro utilizați pentru colorare în biologie

Dispozitive medicale de diagnostic in vitro - Informații furnizate de producător cu reactivi de diagnostic in vitro pentru colorare în biologie (IDT)

Ediție oficială

Standardinform

cuvânt înainte

Sunt stabilite obiectivele și principiile standardizării în Federația Rusă lege federala din 27 decembrie 2002 nr. 184-FZ „Cu privire la reglementările tehnice” și regulile de aplicare a standardelor naționale ale Federației Ruse - GOST R 1.0-2004„Standardizarea în Federația Rusă. Dispoziții de bază»

Despre standard

1 PREGĂTIT DE Laboratorul de Probleme de Diagnostic Clinic și de Laborator al Institutului de Cercetare sănătate Publicăși managementul asistenței medicale a bugetului de stat instituție educațională superior învăţământul profesional Prima Universitate Medicală de Stat din Moscova. I. M. Sechenov” al Ministerului Sănătății al Federației Ruse pe baza propriei traduceri autentice în rusă standard international menționate la paragraful 4

2 INTRODUS de Comitetul Tehnic de Standardizare TC 380 „Clinical cercetare de laboratorși produse medicale pentru diagnostic in vitro”

3 APROBAT ȘI INTRODUS PRIN Ordin agentie federala privind reglementarea tehnică și metrologia din 25 octombrie 2013 Nr. 1201-st.

4 Acest standard este identic cu standardul internațional ISO 19001:2002 „Dispozitive medicale pentru diagnostic in vitro. Informații furnizate de producător cu reactivi de diagnostic in vitro pentru colorare în biologie” (ISO 19001:2002 „/l vitro diagnostic medical devices - Informații furnizate de producător cu reactivi de diagnostic in vitro pentru colorare în biologie”).

Titlul acestui standard internațional a fost modificat de la titlul acestui standard internațional pentru a se alinia cu GOST R 1.5(subsecțiunea 3.5).

5 INTRODUS PENTRU PRIMA Oara

Regulile de aplicare a acestui standard sunt stabilite în GOST R 1.0-2012(secțiunea 8). Informațiile despre modificările aduse acestui standard sunt publicate în indexul de informații publicat anual " Standarde naționale”, și textul modificărilor și amendamentelor - în indicii de informații publicate lunar „Standarde naționale”. În cazul revizuirii (înlocuirii) sau anulării acestui standard, un anunț corespunzător va fi publicat în indexul de informații publicat lunar „Standarde naționale”. Sunt de asemenea plasate informații relevante, notificări și texte Sistem informatic utilizare generală - pe site-ul oficial al Agenției Federale pentru Reglementare Tehnică și Metrologie pe Internet (gost.ru)

© Standartinform, 2014

Acest standard nu poate fi reprodus integral sau parțial, replicat și distribuit ca publicație oficială fără permisiunea Agenției Federale pentru Reglementare Tehnică și Metrologie.

A.4.2.3.3 Procedura de colorare

A.4.2.3.3.1 Deparafinarea și rehidratarea secțiunilor de țesut; efectuați o schimbare de antigen (vezi metoda de colorare de mai sus)

A.4.2.3.3.2 Se incubează cu peroxid de hidrogen. fractiune in masa 3% în apă distilată pentru 5

A.4.2.3.3.3 Se spală cu apă distilată și se pune în TBS timp de 5 min.

A.4.2.3.3.4 Se incubează cu receptor monoclonal de șoarece anti-estrogen uman diluat optim în TBS (vezi A.4.2.3) timp de 20 min până la 30 min.

A.4.2.3.3.5 Se spală cu TBS și se pune în baia TBS timp de 5 minute.

A.4.2.3.3.6 Se incubează cu soluție de lucru imunoglobulină de capră biotinilată anti-șoarece/iepure timp de 20 min până la 30 min.

A.4.2.3.3.7 Se spală cu TBS și se pune în baia TBS timp de 5 minute.

A.4.2.3.3.8 Se incubează cu soluția de lucru a complexului Streptavidină-biotină/peroxidază de hrean timp de 20 până la 30 de minute.

A.4.2.3.3.9 Se spală cu TBS și se pune în baia TBS timp de 5 minute.

A.4.2.3.3.10 Se incubează cu soluție de DAB timp de 5-15 min (folosește mănuși când manevrează DAB).

A.4.2.3.3.11 Clătiți cu apă distilată.

A.4.2.3.3.12 Contracolorarea cu soluție de hematoxilină timp de 30 s.

A.4.2.3.3.13 Clătiți cu apă de la robinet timp de 5 min.

A.4.2.3.3.14 Se clătește cu apă distilată timp de 5 min.

A.4.2.3.3.15 Se deshidratează cu 50% v/v etanol timp de 3 min, apoi 3 min cu 70% v/v și în final 3 min cu 99% v/v.

A.4.2.3.3.16 Se spală în două schimburi de xilen, câte 5 minute fiecare. A.4.2.3.3.17 Prelucrare într-o rășină sintetică hidrofobă.

A.4.2.3.4 Diluții sugerate

Colorarea optimă poate fi obținută prin diluarea anticorpului în TBS pH 7,6 amestecat în volum de la (1 + 50) la (1 + 75) ui atunci când este examinat pe secțiuni de cancer de sân uman înglobat în parafină fixate în formol. Anticorpul poate fi diluat cu TBS, amestecat în volume de la (1 + 50) la (1 + 100) pl, pentru utilizare în tehnologia APAAP și metodele avidină-biotină, în studiul secțiunilor fixate cu acetonă ale țesutului cancerului de sân congelat.

A.4.2.3.5 Rezultate așteptate

Anticorpul etichetează extensiv nucleii celulelor cunoscute ca conţin un număr mare de receptori de estrogeni, cum ar fi celulele epiteliale uterine şi miometriale şi celulele epiteliale mamare normale şi hiperplazice. Colorarea este predominant localizată în nuclee fără colorarea citoplasmei. Cu toate acestea, secțiunile de criostat care conțin cantități mici sau nedetectabile de receptori de estrogeni (de exemplu, epiteliul intestinal, celulele musculare ale inimii, celulele creierului și ale țesutului conjunctiv) arată rezultate negative cu anticorpi. Anticorpul vizează celulele epiteliale ale carcinomului mamar care exprimă receptorul de estrogen.

Vopsirea țesăturilor depinde de manipularea și prelucrarea țesăturii înainte de vopsire. Fixarea necorespunzătoare, înghețarea, dezghețarea, clătirea, uscarea, încălzirea, tăierea sau contaminarea cu alte țesuturi sau fluide pot cauza artefacte sau rezultate fals negative.

A.5 Demonstrarea 7-celule prin citometrie în flux

ATENȚIE - Reactivul conține azidă de sodiu (15 mmol/l). NaN 3 poate reacționa cu plumbul sau cuprul formând azide metalice explozive. Când este îndepărtat, clătiți cu multă apă.

A.5.1 Celule G monoclonale anti-umane de șoarece

Următoarele informații se aplică pentru șoarecele monoclonal anti-umane 7-kpets:

a) identitatea produsului: 7-celule monoclonale de șoarece anti-umane, CD3;

b) clonă: ​​UCHT;

c) imunogen: timocite și limfocite umane din copilărie de la un pacient cu boala Sezary;

d) sursă de anticorpi: anticorpi de şoarece monoclonali purificaţi;

e) specificitate: anticorpul reactioneaza cu celulele T din timus, maduva osoasa, tesutul limfoid periferic si sange. Majoritatea celulelor T tumorale exprimă, de asemenea, antigenul CD3, dar acesta este absent în tumorile limfoide non-T. În concordanță cu modelul sintezei antigenului în timocite normale, cel mai timpuriu loc de detectare în celulele tumorale este citoplasma celulei;

f) Compozitie:

0,05 mol/l tampon Tris/HCI, 15 mmol/l NaN3, pH = 7,2, albumină serică bovină, fracțiunea de masă 1

izotip lg: IgGI;

Purificarea Ig: coloană proteină A Sepharose;

Puritate: fracție de masă aproximativ 95%;

Moleculă conjugată: izotiocianat de fluoresceină izomer 1 (FITC);

- raport (NR): £ 495 nm / £ 278 nm = 1,0 ± 0,1 corespunzător unui raport molar FITC/proteină de aproximativ 5;

e) manipulare și depozitare: stabil timp de trei ani după izolare la temperaturi de la 2 °C la 8 °C

A.5.2 Utilizarea prevăzută

A.5.2.1 General

Anticorpul este destinat utilizării în citometria în flux. Anticorpul poate fi utilizat pentru detectarea calitativă și cantitativă a celulelor T.

A.5.2.2 Tip(e) de material

Anticorpul poate fi aplicat pe suspensii celulare proaspete și fixe, secțiuni de criostat fixate cu acetonă și frotiuri celulare.

A.5.2.3 Procedura de testare a reactivității anticorpilor pentru citometria în flux

Detaliile metodologiei utilizate de producător sunt următoarele:

a) Colectați sângele venos într-un tub care conține un anticoagulant.

b) Izolarea celulelor mononucleare prin centrifugare pe mediu de separare; în caz contrar, lizați eritrocitele după etapa de incubare din d).

c) Se spală celulele mononucleare de două ori cu RPMI 1640 sau soluție salină tamponată cu fosfat (PBS) (0,1 mol/l fosfat, 0,15 mol/l NaCl, pH = 7,4).

d) La 10 pl de celule T anti-umane de șoarece monoclonale conjugate cu FITC, reactiv CD3, se adaugă o suspensie celulară care conține 1-10 celule e (de obicei aproximativ 100 ml) și se amestecă. Se incubează la întuneric la 4°C timp de 30 de minute [anticorpul R-Ficoeritrin-conjugat (RPE) trebuie adăugat în același timp pentru o colorare dublă].

f) Se spală de două ori cu PBS + 2% albumină serică bovină; resuspendați celulele în fluidul adecvat pentru analiza citometrului de flux.

f) Un alt anticorp monoclonal conjugat cu FITC (izotiocianat de fluoresceină) este utilizat ca martor negativ.

e) Se fixează celulele precipitate prin amestecarea cu 0,3 ml de paraformaldehidă, fracție de masă 1% în PBS. Când sunt păstrate la întuneric la 4°C, celulele fixe pot fi menținute până la două săptămâni.

h) Analizați pe un citometru de flux.

A.5.2.4 Diluție sugerată

Anticorpul trebuie utilizat pentru citometria în flux în formă concentrată (10 µl/gest). Pentru utilizare pe secțiuni de criostat și frotiuri celulare, anticorpul trebuie amestecat cu un diluant adecvat într-un raport de volum de (1 + 50) µl.

A.5.2.5 Rezultate așteptate

Anticorpul detectează molecula CD3 pe suprafața celulelor T. Când se evaluează colorarea secțiunilor de criostat și frotiurile celulare, produsul de reacție trebuie localizat pe membrana plasmatică.

Vopsirea țesăturilor depinde de manipularea și prelucrarea țesăturii înainte de vopsire. Fixarea necorespunzătoare, înghețarea, dezghețarea, clătirea, uscarea, încălzirea, secționarea sau contaminarea cu alte țesuturi sau fluide pot cauza artefacte sau rezultate fals negative.

Anexa DA (referință)

Informații privind conformitatea standardelor internaționale și regionale europene de referință cu standardele naționale ale Federației Ruse

Tabel DA.1

Denumire standard internațională de referință conformitate Denumirea și denumirea standardului național corespunzător * Nu există un standard național corespunzător. Înainte de aprobare, se recomandă folosiți traducerea în limba rusă limba acestui standard internațional. Traducerea acestui lucru standardul internațional este în federal centru de informatii reglementarile si standardele tehnice.

STANDARDUL NAȚIONAL AL ​​FEDERATIEI RUSE

DISPOZITIVE MEDICALE PENTRU DIAGNOSTIC IN VITRO Informații furnizate de producător cu reactivi de diagnostic in vitro utilizați pentru colorarea în biologie

Dispozitive medicale de diagnostic in vitro. Informații furnizate de producător cu reactivi de diagnostic in vitro pentru colorare în biologie

Data introducerii - 2014-08-01

1 domeniu de utilizare

Acest standard internațional specifică cerințele pentru informațiile furnizate de producători cu reactivi utilizați pentru colorare în biologie. Cerințele se aplică producătorilor, furnizorilor și vânzătorilor de coloranți, coloranți, reactivi cromogeni și alți reactivi utilizați pentru colorare în biologie. Cerințele pentru informațiile furnizate de producători, așa cum sunt stabilite în prezentul standard internațional, sunt conditie necesara obţinerea de rezultate comparabile şi reproductibile în toate domeniile de colorare din biologie.

Acest standard folosește referințe normative la următoarele standarde regionale internaționale și europene:

ISO 31-8, Cantitati si unitati. Partea 8. Chimie fizică și fizică moleculară (ISO 31-8, Cantități și unități - Partea 8: Chimie fizică și fizică moleculară)

EH 375:2001, Informații furnizate de producător cu reactivi de diagnostic in vitro pentru uz profesional

EH 376:2001, Informații furnizate de producător cu reactivi de diagnostic in vitro pentru autotestare

Notă - Când utilizați acest standard, este recomandabil să verificați valabilitatea standardelor de referință în sistemul de informare publică - pe site-ul oficial al Agenției Federale pentru Reglementare Tehnică și Metrologie pe Internet sau conform indexului anual de informații „Standarde naționale” , care a fost publicată de la 1 ianuarie a anului curent, și pe problemele indexului lunar de informare „Standarde naționale” pentru anul acesta. Dacă a fost înlocuit un standard de referință nedatat, se recomandă utilizarea versiunii curente a acelui standard, luând în considerare toate această versiune schimbări. Dacă standardul de referință la care este dată referința datată este înlocuit, atunci se recomandă utilizarea versiunii acestui standard cu anul de aprobare (acceptare) indicat mai sus. Dacă, după aprobarea acestui standard, se face o modificare a standardului la care se face referire la care se face referire datată, care afectează prevederea la care se face referirea, atunci această prevedere se recomandă a fi aplicată fără a lua în considerare această modificare. Dacă standardul de referință este anulat fără înlocuire, atunci prevederea în care este dată referința la acesta se recomandă să fie aplicată în partea care nu afectează această referință.

3 Termeni și definiții

În acest standard, următorii termeni sunt utilizați cu definițiile lor respective:

3.1 informații furnizate de producător toate informațiile tipărite, scrise, grafice sau de altă natură furnizate împreună cu sau care însoțesc reactivul IVD

3.2 etichetați orice informație tipărită, scrisă sau grafică care apare pe un pachet

Ediție oficială

3.3 reactiv reactiv de diagnostic in vitro utilizat singur sau în combinație cu alte dispozitive medicale pentru diagnosticare in vitro, destinat de producător pentru studii in vitro a substanțelor de origine umană, animală sau vegetală în scopul obținerii de informații relevante pentru detectarea, diagnosticarea, monitorizarea, sau tratarea unei stări fiziologice, a unei stări de sănătate sau a unei boli sau a unei anomalii congenitale.

3.4 colorare care conferă culoare unui material prin reacția cu un colorant sau cu un reactiv cromogen

3.5 compus organic colorat colorant (colorant) care, atunci când este dizolvat într-un solvent adecvat, este capabil să confere culoare unui material

NOTĂ Natura fizică a culorii este absorbția selectivă (și/sau emisia) în regiunea vizibilă a spectrului electromagnetic între 400 și 800 nm. Coloranții sunt molecule cu sisteme mari de electroni delocalizați (sisteme de electroni tt legați). Caracteristicile de absorbție a luminii ale coloranților sunt reprezentate de un spectru de absorbție sub forma unei diagrame în care se compară absorbția luminii și lungimea de undă. Spectrul și lungimea de undă la absorbție maximă depind de structura chimică a colorantului, de solvent și de condițiile măsurării spectrale.

3.6 pata

NOTĂ Vopseaua poate fi preparată prin dizolvarea directă a substanței colorante într-un solvent sau diluarea soluției stoc preparată cu agenți adecvați.

3.6.1 soluție stoc de colorant

NOTĂ Stabilitatea înseamnă că proprietățile unui colorant rămân constante chiar și în prezența altor coloranți.

3.7 reactiv cromogenic reactiv care reacționează cu grupările chimice prezente sau provocate în celule și țesuturi pentru a forma un compus colorat in situ

EXEMPLU Reactivi cromogeni tipici:

a) sare de diazoniu;

b) Reactivul lui Schiff.

3.8 reactiv fluorocrom care emite lumină vizibilă atunci când este iradiat cu lumină de excitație cu o lungime de undă mai scurtă

3.9 imunoglobulină specifică anticorpului produsă de limfocitele B ca răspuns la expunerea la o substanță imunogenă și capabilă să se lege de aceasta

Notă - Molecula unei substanțe imunogene conține una sau mai multe părți cu o compoziție chimică caracteristică, un epitop.

3.9.1 amestec de anticorpi policlonali de anticorpi capabili să reacționeze în mod specific cu o anumită substanță imunogenă

3.9.2 anticorp monoclonal capabil să reacționeze în mod specific cu un singur epitop al unei substanțe imunogene specificate

3.10 sondă de acid nucleic

3.11 proteină lectină de origine neimunogenă cu două sau mai multe situsuri de legare care recunoaște și se leagă de reziduuri de zaharide specifice

4 Cerințe pentru informațiile furnizate de producător

4.1 Cerințe generale

4.1.1 Informații furnizate de producător cu reactivii utilizați pentru colorare în biologie

Informațiile furnizate de producător cu reactivii utilizați pentru colorare în biologie trebuie să fie în conformitate cu ISO 31-8, ISO 1000, EN 375 și EN 376. O atenție deosebită trebuie acordată avertismentelor date în EN 375. În plus, dacă este cazul, cerințele specificate la 4.1.2, 4.1.3 și 4.1.4 ar trebui aplicate diferiților reactivi utilizați pentru colorare în biologie.

4.1.2 Denumirea produsului

Numele produsului trebuie să includă număr de înregistrareîn CAS și numele colorantului și numărul de index, dacă este cazul.

Nota 1 - Numerele de înregistrare în CAS sunt numere de înregistrare în Chimic Ghișeu de ajutor(CAS). Sunt numerele de cod numerice ale substanțelor care au primit un index în Serviciul de Referință Chimică atribuit substanțelor chimice.

Nota 2 - Indexul vopselei dă un număr din 5 cifre, numărul C.I. și un nume special compus pentru majoritatea coloranților.

4.1.3 Descrierea reactivului

Descrierea reactivului trebuie să includă datele fizico-chimice relevante, urmate de detaliile specifice fiecărui lot. Datele trebuie să conțină cel puțin următoarele informații:

a) formula moleculară incluzând contraionul;

b) masa molară (g/mol) specificată în mod explicit, cu sau fără includerea unui contraion;

c) limitele pentru substanțele interferente;

Pentru compușii organici colorați, datele ar trebui să includă:

d) absorbanța molară (în schimb, poate fi dat conținutul moleculei de colorant pur, dar nu și conținutul colorantului total);

e) lungimea de undă sau numărul de unde la absorbție maximă;

f) date din cromatografia în strat subțire, cromatografia lichidă de înaltă performanță sau cromatografia în strat subțire de înaltă performanță.

4.1.4 Utilizarea prevăzută

Ar trebui furnizată o descriere care să ofere îndrumări privind colorarea în biologie și procedurile cantitative și calitative (dacă este cazul). Informațiile trebuie să includă informații cu privire la următoarele:

a) tip(e) de material biologic, manipulare și procesare pre-colorare, de exemplu:

1) dacă pot fi utilizate probe de celule sau de țesut;

2) dacă se poate folosi material congelat sau fixat chimic;

3) protocol pentru manipularea țesuturilor;

4) ce mediu de fixare poate fi aplicat;

b) detalii despre procedura de reacție adecvată utilizată de producător pentru a testa reactivitatea unui colorant, colorant, reactiv cromogen, fluorocrom, anticorp, sondă de acid nucleic sau lectină utilizată pentru colorare în biologie;

c) rezultatul (rezultatele) așteptat(e) în urma procedurii de reacție asupra tipului (tipurilor) de material prevăzut(e) în modul prevăzut de producător;

d) comentarii asupra controlului tisular pozitiv sau negativ adecvat și asupra interpretării rezultatului (rezultatelor);

4.2 Cerințe suplimentare pentru tipuri specifice de reactivi

4.2.1 Fluorocromi

Indiferent de tipul de aplicare, fluorocromii propuși pentru colorare în biologie trebuie să fie însoțiți de următoarele informații:

a) selectivitatea, cum ar fi o descriere a țintei (țintelor) care poate fi demonstrată folosind condiții specifice; lungimile de undă ale luminii de excitație și emisie; pentru fluorocromii legați de anticorpi, raportul fluorocrom/proteină (F/B).

4.2.2 Săruri metalice

În cazul în care compușii care conțin metale sunt propuși pentru utilizare într-o tehnică de absorbție a metalelor pentru colorare în biologie, trebuie furnizate următoarele informații suplimentare:

denumire sistematică; puritate (fără impurități).

4.2.3 Anticorpi

Anticorpii propuși pentru colorare în biologie trebuie să fie însoțiți de următoarele informații:

a) o descriere a antigenului (substanță imunogenă) împotriva căruia este îndreptat anticorpul și, dacă antigenul este determinat de grupul sistemului de diferențiere, numărul CD. Descrierea trebuie să conțină, dacă este cazul, tipul de macromoleculă care trebuie detectată, din care o parte urmează să fie detectată, localizarea celulară și celulele sau țesuturile în care se găsește, precum și orice reactivitate încrucișată cu alți epitopi;

b) pentru anticorpi monoclonali, clonă, metoda de formare (supernatant de cultură tisulară sau lichid ascitic), subclasa de imunoglobuline și identitatea lanțului ușor;

c) pentru anticorpii policlonali, animalul gazdă și dacă se utilizează ser întreg sau o fracțiune de imunoglobulină;

o descriere a formei (soluție sau pulbere liofilizată), a cantității de proteină totală și a anticorpului specific, iar pentru o soluție, natura și concentrația solventului sau a mediului;

e) dacă este cazul, o descriere a oricăror lianți moleculari sau excipienți adăugați la anticorp;

o declarație de puritate, tehnică de purificare și metode pentru detectarea impurităților (de exemplu, Western blot, imunohistochimie);

4.2.4 Sonde pentru acid nucleic

Sondele de acid nucleic propuse pentru colorare în biologie trebuie să fie însoțite de următoarele informații:

secvența de baze și este sonda monocatenară sau cu două catene; masa molară a sondei sau numărul de baze și, dacă este cazul, numărul de fracții (în procente) de perechi de baze guanină-citozină;

marker utilizat (izotop radioactiv sau moleculă neradioactivă), punctul de atașare la sondă (3" și/sau 5") și procentul de substanță în procente din sonda marcată; genă țintă detectabilă (secvență de ADN sau ARN);

e) o descriere a formei (pulbere sau soluție liofilizată) și a cantității (pg sau pmol) sau a concentrației (pg/ml sau pmol/ml), dacă este cazul și, în cazul unei soluții, natura și concentrația solvent sau mediu;

f) revendicări de puritate, proceduri de purificare și metode pentru detectarea impurităților, de exemplu cromatografia lichidă de înaltă performanță;

Anexa A (informativă)

Exemple de informații furnizate de producător cu reactivii utilizați în mod obișnuit

în tehnicile de colorare biologică

A.1 General

Următoarele informații sunt un exemplu de proceduri și nu ar trebui luate în considerare singurul mod în care ar trebui efectuată o procedură. Aceste proceduri pot fi utilizate de către producător pentru a testa reactivitatea coloranților și pentru a ilustra modul în care un producător poate furniza informații pentru a se conforma cu prezentul standard internațional.

A.2 Colorant verde de metil-pironină Y A.2.1 Colorant verde de metil

Informațiile referitoare la colorantul verde de metil sunt următoarele:

a) identitatea produsului:

Verde de metil (sinonime: verde dublu SF, verde deschis);

Număr de înregistrare CAS: 22383-16-0;

Nume și număr index al culorii: albastru de bază 20, 42585;

b) compozitie:

Formula moleculară, incluzând contraionul: C2bH3M32 + 2BF4";

Masa molara cu (sau fara) contraion: 561,17 g mol "1 (387,56 g

Fracția de masă (conținutul) de cation verde de metil: 85%, determinată prin spectrometrie de absorbție;

Limitele admisibile pentru substanțele interferente, date ca fracțiuni de masă:

1) apă: mai puțin de 1%;

2) săruri anorganice: mai puțin de 0,1%;

3) detergenti: nu sunt prezenti;

4) impurități colorate, inclusiv cristale violete: nedetectabile prin cromatografie în strat subțire;

5) compuși indiferenți: 14% amidon solubil;

d) cromatografia în strat subțire: este prezentă o singură componentă principală, corespunzătoare

verde de metil;

e) Manipulare și depozitare: Stabil atunci când este depozitat într-o sticlă maro bine închisă la temperatura camerei (18°C până la 28°C).

A.2.2 Colorant verde de etil

Informațiile referitoare la colorantul verde de etil sunt următoarele:

a) identitatea produsului:

1) verde de etil (sinonim: verde de metil);

2) Număr de înregistrare CAS: 7114-03-6;

3) denumirea și numărul indicelui de vopsea: fără nume în indicele de vopsea, 42590;

b) compozitie:

1) formula moleculară incluzând contraionul: C27H35N32+2BF4";

2) masa molară cu (sau fără) contraion: 575,19 g mol" 1 (401,58 g mol" 1);

3) fracția de masă a cationului verde de etil: 85%, determinată prin spectrometrie de absorbție;

Apa: mai putin de 1%;

Detergenți: niciunul;

c) lungimea de undă maximă de absorbție a soluției de colorant: 633 nm;

d) cromatografia în strat subțire: este prezentă o singură componentă majoră, care se potrivește cu verdele de etil;

A.2.3 Colorantul pironină Y

Materia colorantă Pyronin Y include următoarele informații:

a) identitatea produsului:

1) pironina Y (sinonime: pironina Y, pironina G, pironina G);

2) Număr de înregistrare CAS: 92-32-0;

3) denumire și număr în indexul de vopsea: fără nume în indexul de vopsea, 45005;

b) compozitie:

1) formula moleculară incluzând contraionul: Ci7HigN20 + SG;

2) masa molară cu (sau fără) contraion: 302,75 g mol" 1 (267,30 g mol" 1);

3) fracția de masă a cationului de pironină Y: 80%, determinată prin spectrometrie de absorbție;

4) limitele admisibile ale substanțelor interferente, date ca fracțiuni de masă:

Apa: mai putin de 1%;

Săruri anorganice: mai puțin de 0,1%;

Detergenți: niciunul;

Impurități colorate, inclusiv cristale violet: nedetectabile prin cromatografie în strat subțire;

Compuși indiferenți: 19% amidon solubil;

c) lungimea de undă maximă de absorbție a soluției de colorant: 550 nm;

d) cromatografia în strat subțire: este prezentă doar o singură componentă majoră, care se potrivește cu pironina Y;

e) Manipulare și depozitare: Stabil atunci când este depozitat într-o sticlă de sticlă maro închisă cu grijă, la temperatura camerei între 18 °C și 28 °C.

A.2.4 Utilizarea prevăzută a metodei de colorare cu verde de metil-pironină Y

A.2.4.1 Tip(e) de material

Metil Green-Pyronine Y Stain este folosit pentru colorarea secțiunilor de țesut proaspăt congelat, ceară sau plastic de diferite tipuri.

A.2.4.2 Manipularea și prelucrarea înainte de colorare Posibilii fixatori includ:

Lichid Carnoy [etanol (99% v/v) + cloroform + acid acetic (99% v/v) amestecat în volume (60 + 30 + 10) ml] sau

Formaldehidă (fracție de masă 3,6%) tamponată cu fosfat (pH = 7,0); uscare de rutină, curățare, impregnare și acoperire cu parafină, secționare convențională cu un microtom.

A.2.4.3 Soluție de lucru

Se prepară o soluție de verde de etil sau verde de metil dintr-o cantitate corespunzătoare masei de 0,15 g de colorant pur, calculată ca cation colorat (în exemplele de mai sus 0,176 g în fiecare caz) în 90 ml de fierbinte (temperatura 50 ° C) apa distilata.

Se dizolvă o cantitate corespunzătoare masei de 0,03 g de pironină Y, calculată ca cation colorat (0,038 g în exemplul de mai sus) în 10 ml de tampon ftalat 0,1 mol/l (pH = 4,0). Se amestecă ultima soluție cu o soluție de verde de etil sau verde de metil.

A.2.4.4 Stabilitate

Soluția de lucru este stabilă timp de cel puțin o săptămână când este păstrată într-o sticlă de sticlă maro bine închisă, la temperatura camerei între 18°C ​​și 28°C.

A.2.4.5 Procedura de colorare A.2.4.5.1 Deparafinați secțiunile.

A.2.4.5.2 Udați secțiunile.

A.2.4.5.3 Colorați secțiunile timp de 5 minute la temperatura camerei la aproximativ 22 °C în timpul de lucru

soluţie.

A.2.4.5.4 Se spală secțiunile în două schimburi de apă distilată, câte 2 până la 3 s fiecare.

A.2.4.5.5 Scuturați excesul de apă.

A.2.4.5.6 Se activează în trei schimbări de 1-butanol.

A.2.4.5.7 Se transferă direct din 1-butanol într-o rășină sintetică hidrofobă.

A.2.4.6 Rezultat(ele) așteptat(e)

Următoarele rezultate sunt așteptate cu tipurile de materiale enumerate în A.2.4.1:

a) pentru cromatina nucleară: verde (fixantul lui Karnov) sau albastru (fixant de formaldehidă); a) pentru nucleoli și citoplasmă bogată în ribozomi: roșu (fixantul lui Karnov) sau roșu-liliac (fixant formaldehidă);

c) pentru matricea cartilajului și granulele mastocite: portocaliu;

d) pentru mușchi, colagen și eritrocite: nepătate.

A.3 Reacția Feulgen-Schiff

A.3.1 Colorant pararosanilină

ATENȚIE -Pentru R 40: risc posibil efecte ireversibile.

Pentru S 36/37: Sunt necesare îmbrăcăminte de protecție și mănuși.

Următoarele informații se aplică pentru colorantul pararosanilină.

a) identitatea produsului:

1) pararosanilină (sinonime: rubin de bază, parafuxină, paramagenta, magenta 0);

2) Număr de înregistrare CAS: 569-61-9;

3) denumirea și numărul index al vopselelor: roșu de bază 9, 42500;

b) compozitie:

1) formula moleculară incluzând contraionul: Ci9Hi8N3 + SG;

2) masa molară cu (și fără) pritivoion: 323,73 g mol "1 (288,28 g mol" 1);

3) fracția de masă a cationului de pararosanilină: 85%, determinată prin spectrometrie de absorbție;

4) limitele admisibile ale substanțelor interferente, date ca fracțiuni de masă:

Apa: mai putin de 1%;

Săruri anorganice: mai puțin de 0,1%;

Detergenți: nu sunt prezenți;

Impurități colorate: omologii de pararosanilină metilat pot fi prezenți în urme, așa cum este determinat prin cromatografie în strat subțire, dar acridina este absentă;

Compuși indiferenți: 14% amidon solubil;

c) lungimea de undă maximă de absorbție a soluției de colorant: 542 nm;

d) cromatografia în strat subțire: este prezentă o componentă principală corespunzătoare

pararosanilină; omologi metilati ai pararosanilinei în urme;

e) Manipulare și depozitare: Stabil atunci când este depozitat într-o sticlă maro bine închisă, la temperatura camerei între 18 °C și 28 °C.

A.3.2 Utilizarea prevăzută a reacției Feulgen-Schiff

A.3.2.1 Tip(e) de material

Reacția Felgen-Schiff este utilizată pentru secțiuni cerate sau plastice ale diferitelor tipuri de țesuturi sau material citologic (frotiu, amprentă tisulară, cultură celulară, monostrat):

A.3.2.2 Manipularea și prelucrarea înainte de colorare

A.3.2.2.1 Posibilii fixativi

Posibilii fixatori includ:

a) histologie: formaldehidă (fracție de masă 3,6%) tamponată cu fosfat (pH = 7,0);

b) citologie:

1) material de fixare lichid: etanol (fracție de volum 96%);

2) material uscat la aer:

Formaldehidă (fracție de masă 3,6%) tamponată cu fosfat;

Metanol + formaldehidă (fracție de masă 37%) + acid acetic (fracție de masă 100%), amestecat în volume (85 + 10 + 5) ml.

Materialul fixat în fixativul lui Buin este impropriu pentru această reacție.

Detalii privind procedura utilizată de producător pentru a testa reactivitatea reactivului cromogen sunt prezentate la A.3.2.2.2 la A.3.2.4.

A.3.2.2.2 Reactiv Pararosaniline-Schiff

Se dizolvă 0,5 g clorură de pararosanilină în 15 ml de acid clorhidric 1 mol/l. Se adaugă 85 ml dintr-o soluție apoasă de K2S205 (fracție de masă 0,5%). Așteptați 24 de ore, agitați 100 ml din această soluție cu 0,3 g cărbune timp de 2 min si filtrat. Depozitați lichidul incolor la o temperatură care nu este mai mică de 5 °C. Soluția este stabilă timp de cel puțin 12 luni într-un recipient bine închis.

A.3.2.2.3 Soluție de spălare

Se dizolvă 0,5 g de K 2 S 2 O s în 85 ml apă distilată. Se adaugă 15 ml acid clorhidric 1 mol/l. Soluția este gata de utilizare imediată și poate fi utilizată în 12 ore.

A.3.2.3 Procedura de colorare

A.3.2.3.1 Deparafinați secțiunile cerate în xilen timp de 5 min, apoi se spală timp de 2 min, mai întâi în etanol 99% v/v și apoi în etanol 50% v/v.

A.3.2.3.2 Secțiuni de plastic umede, secțiuni cerate deparafinate și material citologic în apă distilată timp de 2 min.

A.3.2.3.3 Se hidrolizează materialul în 5 mol/l acid clorhidric la 22 °C timp de 30 min până la 60 min ( timpul exact hidroliza depinde de tipul de material).

A.3.2.3.4 Clătiți cu apă distilată timp de 2 min.

A.3.2.3.5 Se colorează cu pararosanilină timp de 1 oră.

A.3.2.3.6 Se spală în trei schimbări succesive de soluție de spălare a câte 5 minute fiecare.

A.3.2.3.7 Se spală de două ori cu apă distilată, câte 5 minute de fiecare dată.

A.3.2.3.8 Se deshidratează în etanol 50% v/v, apoi 70% v/v și în final etanol 99% timp de 3 minute de fiecare dată.

A.3.2.3.9 Se spală de două ori în xilen timp de 5 minute de fiecare dată.

A.3.2.3.10 Preluare într-o rășină sintetică hidrofobă.

A.3.2.4 Rezultate așteptate

Următoarele rezultate sunt așteptate cu tipurile de materiale enumerate în A.3.2.1:

Pentru nucleele celulare (ADN): roșu.

A.4 Demonstrarea imunochimică a receptorilor de estrogeni

ATENȚIE - Reactiv care conține azidă de sodiu (15 mmol/l). NaN 3 poate reacționa cu plumbul sau cuprul formând azide metalice explozive. Când este îndepărtat, clătiți cu multă apă.

A.4.1 Receptor monoclonal de șoarece anti-estrogen uman

Următoarele informații se referă la receptorul monoclonal de șoarece anti-estrogen uman.

a) identitatea produsului: receptor monoclonal de șoarece anti-estrogen uman, clona 1D5;

b) clona: ​​1D5;

c) imunogen: proteină recombinantă a receptorului de estrogen uman;

d) sursă de anticorpi: anticorp monoclonal de șoarece eliberat sub formă lichidă ca supernatant de cultură de țesut;

e) specificitate: anticorpul reacţionează cu domeniul L/-terminal (regiunea A/B) al receptorului. La imunoblotare, reacţionează cu un lanţ polipeptidic de 67 kDa obţinut prin transformarea Escherichia coli şi transfectarea celulelor COS cu vectori plasmidii care exprimă receptorul de estrogen. În plus, anticorpul reacționează cu extractele citosolice ale endometrului luteal și cu celulele liniei de cancer de sân uman MCF-7;

f) reactivitate încrucișată: anticorpul reacționează cu receptorii de estrogeni de șobolan;

e) compoziţie: supernatant de cultură tisulară (mediu RPMI 1640 conţinând ser fetal de viţel) dializat faţă de 0,05 mmol/l Tris/HCI, pH = 7,2, conţinând 15 mmol/l NaN3.

Concentratia Ig: 245 mg/l;

Izotip Ig: IgGI;

Identitatea lanțului ușor: kappa;

Concentrația totală de proteine: 14,9 g/l;

h) Manipulare și depozitare: Stabil până la trei ani atunci când este depozitat la 2 °C până la 8 °C.

A.4.2 Utilizarea prevăzută

A.4.2.1 Generalități

Anticorpul este utilizat pentru detectarea calitativă și semi-cantitativă a expresiei receptorului de estrogen (de exemplu, cancerul de sân).

A.4.2.2 Tip(e) de material

Anticorpul poate fi aplicat pe secțiuni de parafină fixate cu formol, secțiuni congelate fixate cu acetonă și frotiuri celulare. În plus, anticorpul poate fi utilizat pentru a detecta anticorpi prin test imunosorbent legat de enzime (ELISA).

A.4.2.3 Procedura de colorare pentru imunohistochimie

A.4.2.3.1 General

Pentru secțiunile de țesut încorporate în parafină fixate în formalină, sunt utilizate o varietate de tehnici de colorare sensibile, inclusiv tehnica imunoperoxidază, tehnologia APAAP (fosfatază alcalină anti-fosfatază alcalină) și metode avidin-biotină, cum ar fi LSAB (Labeled StreptAvidin-Biotin) metode. Modificările antigenului, cum ar fi încălzirea în tampon citrat de 10 mmol/l, pH=6,0, sunt obligatorii. Lamele nu trebuie să se usuce în timpul acestei procesări sau în timpul următoarei proceduri de colorare imunohistochimică. Metoda APAAP a fost propusă pentru colorarea frotiurilor celulare.

Detalii privind procedura utilizată de producător pe secțiunile de țesut fixate cu formalină încorporată în parafină pentru a testa reactivitatea anticorpilor pentru imunohistochimie sunt prezentate la A.4.2.3.2 la A.4.2.3.4.

A.4.2.3.2 Reactivi

A.4.2.3.2.1 Peroxid de hidrogen, 3% din masă în apă distilată.

A.4.2.3.2.2 Soluție salină tampon Tris (TBS), constând din 0,05 mol/l Tris/HCI și 0,15 mol/l NaCI la pH =

A.4.2.3.2.3 Anticorp primar constând dintr-un receptor monoclonal de șoarece anti-estrogen uman diluat optim în TBS (vezi A.4.2.3.4).

A.4.2.3.2.4 Imunoglobulina biotinilata de capra anti-soarece/iepure, functionala

Preparați această soluție cu cel puțin 30 de minute, dar nu mai devreme de 12 ore înainte de utilizare, după cum urmează:

5 ml TBS, pH = 7,6;

50 pl de anticorp de imunoglobulină de capră anti-șoarece/iepure biotinilat, izolat cu afinitate în soluție tampon fosfat 0,01 mol/l, 15 mmol/l NaN3, suficient pentru a aduce concentrația finală la 10-20 mg/ml.

A.4.2.3.2.5 Complex StreptAvidin-biotină/peroxidază de hrean (StreptABComplex/HRP), care funcționează

Pregătiți această soluție după cum urmează:

5 ml TBS, pH = 7,6;

50 ui StreptAvidin (1 mg/l) în 0,01 mol/l soluţie tampon fosfat, 15 mmol/l NaN3;

50 pl peroxidază de hrean biotinilat (0,25 mg/l) în soluţie tampon fosfat 0,01 mol/l, 15 mmol/l NaN3;

A.4.2.3.2.6 Soluție de substrat de diaminenzidină (DAB)

Se dizolvă 6 mg de 3,3"-diaminenzidinetetraclorhidrat în 10 ml de 0,05 mol/l TBS, pH = 7,6. Se adaugă 0,1 ml de peroxid de hidrogen, fracțiune de masă 3% în apă distilată. Dacă are loc o precipitare, se filtrează.

A.4.2.3.2.7 Hematoxilina

Se dizolvă 1 g de hematoxilină, 50 g de sulfat de aluminiu și potasiu, 0,1 g de iodat de sodiu și 1,0 g de acid citric în 750 ml de apă distilată. Se diluează la 1000 ml cu apă distilată.